PERCOBAAN 3
“ANALISA PIGMEN
TUMBUHAN DENGAN MENGGUNAKAN KROMATOGRAFI KERTAS DAN SPEKTROSKOPI UV-VIS”
A.
Tujuan Percobaan
1.
Memisahkan zat warna dari ekstrak tumbuhan menggunakan kromatografi kertas.
2.
Menentukan panjang gelombang maksimum yang diserap tiap zat warna yang
diperoleh.
3.
Menyarankan jenis dan struktur molekul klorofil dari data spektrum UV-Vis
yang diberikan instrumentasi spektroskopi UV-Vis.
B.
Prinsip Percobaan
Memisahkan komponen
zat warna dari ekstrak tumbuhan berdasarkan distribusinya
terhadap fase diam (air yang terikat pada kertas) dengan fase gerak (etanol)
yang sesuai dengan tingkat kepolarannya
sehingga diperoleh kromatogram. Kemudian kromatogram yang diperoleh dipisahkan
dan dilarutkan dengan pelarut etanol untuk di uji jenis dan struktur molekul
klorofil dengan menggunakan spektroskofi UV-Vis berdasarkan penyerapan energi radiasi
elektromagnetik dari sinar UV-Vis dengan energi tertentu, sehingga
elektron-elektron dalam larutan sampel mengalami transisi elektronik dan
kemudian elektron tersebut kembali ke keadaan dasar dengan panjang gelombang
tertentu yang ditangkap oleh detektor dan ditampilkan dalam bentuk spectrum
pada layar komputer.
C. Dasar Teori
1. Kromatografi kertas
Kromatografi adalah suatu teknik untuk
memisahkan campuran menjadi komponennya dengan bantuan perbedaan sifat fisik
masing – masing komponen yang berdasarkan partisi antara cuplikan dengan fasa gerak
dan fasa diam.
Molekul yang terlarut dalam fase gerak, akan melewati kolom yang
merupakan fase diam.Molekul yang memiliki ikatan yang kuat dengan kolom akan
cenderung bergerak lebih lambat dibanding molekul yang berikatan lemah.Dengan
ini, berbagai macam tipe molekul dapat dipisahkan berdasarkan pergerakan pada
kolom.
Komponen utama kromatografi adalah fasa stationer dan
fasa mobil dan kromatografi dibagi menjadi beberapa jenis bergantung pada jenis
fasa mobil dan mekanisme pemisahannya, seperti ditunjukkan di Tabel 1.1.
Tabel
1.1 Klasifikasi kromatografi
Kriteria
|
Nama
|
Fasa
mobil
|
Kromatografi cair, kromatografi
gas
Kromatografi adsorpsi, kromatografi partisi |
Mekanisme
|
Kromatografi
pertukaran ion
kromatografi gel |
Fasa
stationer
|
Kromatografi
kolom, kromatografi lapis tipis,
kromatografi kertas |
Kromatografi kertas merupakan salah satu metode pemisahan
berdasarkan distribusi suatu senyawa pada dua fasa yaitu fasa diam dan fasa
gerak. Pada kromatografi kertas, fase diam adalah air yang terikat pada kertas
dan fase geraknya adalah pelarut organik.
Pada kromatografi kertas penampakan noda dapat dilihat hanya dengan
disemprot dengan pereaksi spesifik, seperti: dragendorff, serium sulfat,
ninhidrin, dan FeCl3. Analisis kualitatif menggunakan kromatografi
kertas dilakukan dengan cara membandingkan harga relative response factor (Rf).
Nilai Rf identik dengan time retention (tR) atau volume retention (VR).
Nilai Rf dapat ditentukan dengan cara: berikut
untuk mendownload laporan ini secara lengkap silahkan klik disini atau disini untuk mendapatkan passwordnya silahkan hubungi email saya atau twitter saya
Tidak ada komentar:
Posting Komentar